.

Научно-производственное предприятие
«Композитные материалы и технологии»

Санкт-Петербург

Влияние наночастиц производных фуллерена С60 на обменные процессы у мышей.

Бородулин В.Б., Дудакова Ю.С., Логинова Н.Ю.
ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ Росздрава», кафедра биохимии

Наночастицы фуллерена представляют собой новый класс сфероидальных молекул, состоящих исключительно из атомов углерода. Благодаря своим свойствам в настоящее время они находят широкое практическое применение в различных областях физики, химии, биологии. Относительно низкая токсичность, проявление фотофизических и фотохимических свойств делает фуллерены весьма перспективными объектами для использования в медицине [1,2].
Усовершенствование молекулы фуллерена открывает возможность синтеза на его основе биологически активных веществ. Перспектива внедрения препаратов на основе фуллерена в медицинскую практику напрямую зависит от анализа действия наночастиц на обменные процессы человека и животных.
В связи с этим была поставлена цель: изучить влияние наночастиц фуллерена С60 и его производных на обменные процессы у белых беспородных мышей-самцов в возрасте 3-х месяцев.

Материалы и методы исследования

Объектами исследования в работе являлись производные фуллерена С60:
− фуллеренпирролидины:
а)N–метил–1(4-диметиламинофенил)фуллерено-С60-[1,9c]пирролидин (соединение 1) (рис.1., 1),
б)N-метил-1(4-нитрофенил)фуллереноС60[1,9c] пирролидин (соединение 2)(рис.1, 2).
В качестве растворителя для этих соединений использовался диметилсульфооксид (ДМСО).
− водорастворимый комплекс поливинилпирролидона с фуллереном С60 (ПВП*С60) (3)

R1= Н, R2 = N (CH3)2 (1)
R1= H, R2 = NO2 (2)

рис1
рис1

(3)
Рис.1. Исследуемые производные фуллерена С60
Работа выполнена на белых беспородных трехмесячных самцах мышей, содержавшихся на стандартном рационе вивария. Мышей распределили в 5 экспериментальных групп. Первой группе перорально вводился комплекс ПВП*С60, второй группе – Соединение1, третьей группе –Соединение2, четвертой группе – ДМСО (контроль для фуллеренпирролидинов). Пятая группа служила контролем по отношению ко всем исследуемым соединениям и не подвергалась воздействию исследуемых веществ.
Суточная доза вводимых веществ составляла 1*10-2 мг на 20 грамм
массы мыши.
Соединения вводились мышам в виде раствора (100мкл) в течение 5 дней. По окончании проведения эксперимента мышей декапитировали.
В клинико-лабораторных исследованиях анализировалась сыворотка крови. Для этого в ходе процедуры декапитации собиралась смешанная кровь с горлового среза в сухую чистую пробирку без использования антикоагулянтов. Для ускоренного образования кровяного тромба пробирку со смешанной кровью помещали на 10 минут в термостат с температурой 370 С. Затем, используя тонкую стеклянную палочку, тромб аккуратно отделяли от стенок пробирки. После этого пробирку помещали в центрифугу и центрифугировали 10 минут.
Полученную сыворотку переносили в сухую чистую пробирку.
Оценка влияния комплекса ПВП*С60 и фуллеренпирролидинов на обменные процессы, происходящие в организме, была проведена на основе данных, полученных в ходе биохимического исследования сыворотки крови на биохимическом анализаторе “Hospitex screen master” (Швейцария).
Прибор представляет собой спектрофотометр со стандартным набором реагентов, предназначенный конкретно для определения одного из изучаемых биохимических параметров крови: глюкозы, общего белка, альбумина, холестерина, лактата, лактатдегидрогеназы (ЛДГ), аланинаминотрасферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), креатинкиназы (КК), креатинина, мочевины, щелочной фосфатазы (ЩФ), γ-глутамилтрансферазы (ГГТ).
Методы являются унифицированными [3].
В работе были использованы жидкие реагенты производств ЗАО «Диакон-ДС», «Biosub® LA», «Витал Диагностике СПб».
Цифровые данные обработаны статистически по методу Стьюдента с определением достоверности различий между контрольной и опытными группами. Достоверными считались различия между группами при Р<0,05.

Результаты исследований

Результаты биохимического анализа отражены в таблице.

Таблица. Влияние исследуемых соединений на биохимические показатели сыворотки крови.